isoSTED-Mikroskopie

Die isoSTED-Mikroskopie ist eine geschickte Kombination aus STED- und 4Pi-Mikroskopie und verkleinert den konfokalen (zigarrenförmigen) Lichtfokus auf eine Kugel von nur 30 nm Durchmesser. Dies entspricht einer Reduzierung des fokalen Volumens um drei Größenordnungen [Schmidt et al., 2009].
Die gleichzeitige kohärente Verwendung von zwei sich gegenüberstehenden Objektiven (4Pi-Konfiguration) ermöglicht hierbei die nahezu isotrope Auflösung in allen drei Raumrichtungen.

	Vergleich des konfokalen Fokus (links) und des kugelförmigen isoSTED Fokus (rechts). (Bild: Schmidt & Egner / MPIbpc)

Mit diesem „3D-Nanoskop“ war es erstmals möglich, das Innere von Mitochondrien (den Kraftwerken der Zelle) in intakten Zellen mit dem Lichtmikroskop aufzulösen [Schmidt et al., 2008]. So konnte in ungekannter Schärfe die Verteilung von zwei Proteinen, von denen das eine Cluster in der Mitochondrienmembran bildet, während das andere im Inneren zu finden ist, abgebildet werden.
		Verteilung der Proteine Tom20 (rot) und mtHsp70 (grün) in Mitochondrien. (Bild: Schmidt & Egner / MPIbpc)

Weiterführende Informationen:

Schmidt, R., C. A. Wurm, S. Jakobs, J. Engelhardt, A. Egner, S. W. Hell (2008):
"Spherical nanosized focal spot unravels the interior of cells"
Nature Meth. 5 (6), 539 - 544

Schmidt, R., C. A. Wurm, A. Punge, A. Egner, S. Jakobs, S. W. Hell (2009):
"Mitochondrial Cristae Revealed with Focused Light"
Nano Lett. 9 (6), 2508-2510

Hell, S. W., R. Schmidt, A. Egner (2009):
"Diffraction-unlimited three-dimensional optical nanoscopy with opposing lenses"
Nature Photonics 3, 381 - 387